sábado, 27 de junio de 2009
Examen Practico 3ER Parcial
Material de laboratorio
Centro de bachillerato tecnológico, industrial y de servicios no.155
Materia: Operar equipo y materiales de laboratorio.
Segundo semestre.
Examen Práctico.
Nombre del alumno: Borjas Young Miriam Alejandra.
Mesa #3
Grupo: 2LM
Profesor: Víctor Manuel Alfaro López.
-Portada
-Datos personales
-Bitácora de examen
-Competencias
-Introducción
-Desarrollo de prácticas
-Conclusión
INTRODUCCION.
En este documento se presenta el desarrollo de nuestro examen practico, también señala las competencias utilizadas tanto en la materia como en las practicas.
Competencias aplicadas en Operar Equipo y Materiales de Laboratorio.
Categoría: Aprende de forma autónoma.
Competencia: Aprender por iniciativa e interés propio a lo largo de la vida.
Categoría: Trabaja en forma colaborativa.
Competencias: Participa y colabora de manera en equipos diversos.
Categoría: Se expresa y se comunica.
Competencia: Escucha, interpreta y emite mensajes pertinentes en distintos contextos mediante la utilización de medios, códigos y herramientas apropiadas.
Categoría: Se autodetermina y cuida de si.
Competencia: Se conoce y valora así mismo y aborda problemas y retos teniendo en cuenta los objetivos que persigue.
Examen Práctico.
Comenzamos por llenas nuestro vale de material, vestimos la mesa con papel blanco, adaptamos nuestra área de trabajo para iniciar la práctica.
Hicimos nuestra regla de 3 para darnos cuenta cuantos gramos pondríamos en cada caja.
Tomamos 80 ml de agua destilada para 4 cajas petri cuya cantidad para cada una es de 5 gr. aproximadamente. Mezclamos el agar con el agua y dejamos 1 min. Para que se concentrara y después lo dejamos 1 min. En el mechero, muñequeando para que hirviera, y ya que hirvió, teníamos que taponear con una torunda de algodón y enrollarla con tape para con eso tapar el matraz. Revisamos el autoclave que estuviera lista para introducir el matraz con el agar, pero antes teníamos que rotular el matraz con los datos siguientes:
v Hora
v Fecha
v Nombre del medio de cultivo
v No. De mesa
v Grupo
Después en el transcurso del tiempo realizamos también la práctica 8 y 9.
Comenzamos por hacer la técnica de venopuncion a dos compañeros. Vaseamos la sangre ,2.5 ml del tubo de ensaye tapón morado y 2.5 ml al tubo con tapón rojo.
En total obtuvimos 10 ml de sangre, 5 de cada compañero.
Después metimos los tubos de tapón rojo a la centrifuga para que se separara a 1500 revoluciones por minuto durante 5 minutos.
Mientras se centrifugaba la sangre iniciamos con la práctica de aglutinación en sangre.
MATERIALES DE LA PRÁCTICA # 1 Y # 2
- Autoclave
- 4 cajas petri
- Agua destilada
- Balanza
- Vidrio de reloj
- Agar verde brillante
- Vaso de precipitado
- Probeta
- Agitador
- Espátula
- Mecheros de bunsen
- Tape
- Algodón
Era ahí cuando comenzaba la aglutinación en el RH de los 2 compañeros se aglutino.
Se observaba como se aglutinaba la sangre.
MATERIALES DE LA PRÁCTICA #9
- Jeringa hipodérmica
- Torundas de algodón secas y con alcohol
- Tubo de ensaye de tapón morado
- Pipeta pasteur y su bulbo
- Laminilla escavada
- Palitos de madera
- Reactivos
- Torniquete
Practica # 8
Ya que se centrifugo la sangre del tubo, punteamos 6 gotas de cada tubo en la laminilla continuamos por ponerle ahora 6 gotas de los reactivo H, O, A, B Brucella A y Proteus 0x19 y revolvimos con los palitos de madera y observamos. Ya listo enfocamos en objetivo 10x en el microscopio pero no hubo aglutinación.
MATERIALES DE LA PRÁCTICA # 8
- Jeringa hipodérmica
- Centrifuga
- Torniquete
- Torundas de algodón
- Tubo de ensaye de tapón rojo
- Microscopio
- Pipeta pastear
- Palitos de madera
- Laminilla escavada
- Reactivos
Terminando las prácticas 8 y 9 terminamos por hacer el vaciado a las cajas esterilizando la boquilla del vaso de precipitado de 50 ml. Para no contaminar el medio, ya vaseado todo lo del medio a las cajas rotulamos y las metimos al refrigerador.
Practica # 3
Martes 16 de junio
MATERIALES
- Mecheros de bunsen
- Tubo de ensaye
- Tubo cónico
- Gradilla
- Centrifuga
- Asa bacteriológica
- Jeringa
- Torundas
- Cajas petri con medio de cultivo
- Torniquete
- Hisopo
DESARROLLO
Iniciamos por ponernos nuestro equipo de bioseguridad. Nosotros ya traíamos las muestras que íbamos a sembrar que eran orina y copro.
Comenzamos a esterilizar las asas bacteriológicas
Después tomábamos un poco de la muestra y sembrábamos dependiendo del tipo de siembra
Continuábamos esterilizando y tomando de la muestra hasta que quedo listo.
Rotulamos de nuevo y metimos las cajas a la estufa.
Practica # 4
En esta práctica observamos lo que creció en el medio de cultivo.
Practica #5
Frotis
MATERIALES:
- Cajas petri con medio de cultivo elaborado
- Asa bacteriológica
- Vaso de precipitado de 25 ml de agua destilada
- 2 mecheros de bunsen
- Papel secante
- Portaobjetos
- Papel para vestir mesa
DESARROLLO:
Tomamos un portaobjetos limpio para realizar el frotis.
Esterilizamos el asa bacteriológica en el mechero, después tomamos una gota de agua con el asa y la colocamos en el portaobjetos, agarramos un poco de la muestra de nuestras cajas y colocamos en el porta y comenzamos a hacer el barrido para que no quedara grueso, el movimiento es de derecha a izquierda.
Y si faltaba mas agua le poníamos hasta que se mirara delgado.
Ya que terminamos lo pasamos por el mechero para que se secara.
Practica #6
Continuamos por hacer la tinción:
MATERIALES:
- Portaobjetos con frotis
- Papel secante
- Cristal violeta
- Lugol
- Alcohol
- Safranina
- Algodón seco
- Caja copli
Comenzamos por colocar el portaobjetos en la primera solucion de cristal violeta por 1 min.
Seguimos por lavar con solucion lugol.
Cubrimos con lugol por 1 min., escurrimos y descoloramos con alcohol. Lavamos con agua, safranina por 1 min. . Y secamos al aire.
Después de teñir la lamina llevando a cabo estas reglas y pasos seguimos por enfocar.
Practica #7
MATERIALES:
Portaobjetos teñido
Microscopio
Papel secante
Aceite de inmersión
Papel para vestir mesa
DESARROLLO:
Colocamos el portaobjetos en la platina, ya con el aceite de inmersión, subimos la platina, colocamos el objetivo 100x, Tenemos que pegar la gota del aceite al objetivo. Movemos el tornillo micrométrico para encontrar la imagen deseada.
Conclusión.
Este trabajo es con el fin de recopilar datos de nuestro examen práctico y también para entrelazar las competencias con nuestras prácticas realizadas.
martes, 9 de junio de 2009
Tecnica de Esterilizacion (Autoclave)
La autoclave se debe de manejar en su interior con agua destilada la cual se debe de medir para registrar el volumen del líquido utilizado, el que debe ir al ras de la parrilla.
La presión de 15 Libras que nos da 120°C si se descuida en su manejo puede ocasionar accidentes severos.
Equipo de esterilización de calor seco:El equipo de esterilización de calor seco es para realizar trabajos inmediatos de cristalería, metales y todo tipo de esterilización pero ordenada, para no tener errores en la actividad. Se opera por corriente alterna (amperes) 110 voltios y alcanza temperaturas de hasta 510 °C
lunes, 8 de junio de 2009
Practica#8 Prueba de Aglutinacion en Suero Sanguineo
Prueba de aglutinación en suero sanguíneo
El alumno de laboratorio de análisis clínicos aprenderá a realizar una prueba de aglutinación en sangre y suero sanguíneo. Utilizando los instrumentos de laboratorio equipo científico y reactivos para alcanzar su objetivo en la elaboración de un examen clínico denominado reacciones febriles. Dándole oportunidad de poder investigar microorganismos bacteriológicos pertenecientes al grupo de las enterobacterias donde encontraremos, salmonella, brucilla, proteus.
Materiales:
v Tubo de ensayo tapón rojo
v Palito de madera
v Torundas de algodón secas
v Centrifuga
v Microscopio
v Reactivo febriclean
v Jeringa hipodérmica desechable
v Torniquete
v Torundas alcoholizadas
v Maskingtape
v Pipeta pasteur
v Vulvo
NOTA:
Utilizar técnica de veno punción para la extracción de sangre fresca donde se obtendrá por medio de centrifugación de la separación del paquete sanguíneo (sangre, suero, plasma).
En esta prueba se debe de aplicar el tema de serologia ya que ocuparemos los tificos H O paratíficos A y B brucilla abortus, y proteus OX19.
Esta prueba es exclusivamente de aglutinación por lo que se debe observar a tras luz de forma microscópica y en el microscopio en objetivo 10X de forma microscopica.
DESARROLLO:
1.- Se utiliza la tecnica de veno punción de sangre fresca en volumen de 2.5 ml.
2.- Una vez obtenida la sangre se deposita en un tubo con tapón rojo pero antes, en el inicio de la extracción y baseamiento al tubo, se toma el tiempo de coagulación el cual es de 1 a 2 min. hasta 5 y en algunas ocasiones 8 min.
3.- Ya coagulada la sangre se retira el tapón del tubo y se depositan todos los tubos en la centrifuga para centrifugar a 1500 revoluciones/ min. Esto nos dará como resultado la separación de paquetes. Una vez que se tengan los paquetes de sangre y plasma se requiere un tubo de sangre vació para trasvasar el plasma exclusivamente con el que se va a trabajar el punteo en la lamina de cristal utilizando la pipeta pasteur para puntear.
4.- Ya obtenido el punteo de plasma en la lamina de cristal, se le agrega una gota de reactivo febriclean teniendo el cuidado necesario del orden de los serotipos “O H A B Brucella y Proteus”.
Ya obteniendo este proceso y orden de serotipos utilizamos pequeños pedacitos de palillos de madera y mezclamos de forma individual cada uno de ellos, no se debe utilizar el mismo palillo antes usado.
5.- Ya estando mezclada la solución plasmática y reactivo de febriclean realizamos pequeños movimientos en rotación y traslación.
Ya terminando la mezcla observamos de forma macroscopica y si obtenemos una imagen punteada es que es una prueba positiva.
En este examen de laboratorio se llevan a cabo las 3 etapas preanalitica, analítica, postanalitica
Practica #7 Observacion Microscopica
Observación microscópica a 100X
Una vez tenida la laminilla con el frotis se le aplica una gota de aceite de inmersión para poder observar el objetivo en 100X.
En este proceso de observación microscópica tenemos la facilidad de poder observar formas esféricas y bacilos los que nos da como resultado observar las coloraciones que se presentan en la tinción de Gram.
La presentación en esferas nos indica que estamos observando bacterias denominadas cocos, donde debemos investigar sus características y nombres de importancia medica.
Cuando observamos bastoncitos estamos tratando de identificar bacilos donde encontraremos una gran variedad de ellos de forma estructural.
Practica #6 Tincion de Gram
Tincion de gram
Se debe realizar una tincion de gram. en el frotis preparado anteriormente para poder llegar ala observación microscopica de los microorganismos denominados “bacterias” los que observamos en formas de esferas, bastones y espirales.
Cave mencionar que en este elemento de observación no podriamos llegar a observar microscópicamente las espirales.
Materiales:
v Caja de petri
v Portaobjetos con frotis
v Algodón seco
v Papel secante
v Mecheros de bunsen
v Aceite de inmersion
v Microscopio
Desarrollo:
Realizamos el proceso de tincion utilizando la tincion de gram. que anteriormente ya investigamos para aplicar la tecnica correspondiente en la tincion ( 9 pasos con esta tecnica) la que se basa en el tiempo.
Una vez teñida la lamina de cristal verificamos que no se queme con la tintura por lo que nos sirve el frotis y como resultado debemos elaborar otro frotis.
Si la laminilla en su termino esta bien teñida acudimos a aplicamos una gota de aceite de inmersion lo montamos en la platina del microscopio lo aseguramos con las pinzas de la platina una vez asegurada realizamos el enfoque en 100X para que nuestra observación microscopica de resultado de poder visualizar las bacterias de formas esfericas y de forma de baston ambas se pueden encontrar en una sola pieza 2, 3, 4 piezas en cadenas largas y agrupadas hasta el tercer plano a estas esferas se les denomina cocos. Así mismos los bastones
Practica #5 Frotis
Elaboración de un Frotis
El alumno debe realizar un Frotis con el producto obtenido en las cajas petri el cual debe ser fino y delgado para poder realizar un proceso de tincion.
Materiales:
v Cajas petri con medio de cultivo
v Asa bacteriologica
v Vaso de precipitados con agua destilada (25 ml.)
v Mecheros de bunsen
v Papel secante
Desarrollo:
Se toma un portaobjetos limpio para poder realizar en su superficie un frotis fresco con el material de la caja petri “bacteriologica”
Con el asa bacteriologica se va a realizar un barrido en el porta en sus parte central, esterilizando primero el asa bacteriologica en la flama del mechero al rojo vivo, se retira, se introduce el vaso de precipitado se toma una gota de agua con el asa se introduce al a caja petri sobre las colonias desarrolladas se toma una pequeña muestra y se deposita en el portaobjetos dandole pequeños movimientos de izquierda a derecha para estender el producto obtenido.
Si el frotis se encuentra grueso se vuelve a esterilizar el asa bacteriologica se vuelve a tomar una gota de agua, se deposita en el porta sobre el producto anteriormente depositado y se realiza nuevamente la misma maniobra y asi sucesivamente hasta que quede finalmente delgado.
Una vez terminado el proceso de barrido realizamos una maniobra sobre la flama del mechero con el mismo porta sin dejarlo fijamente en la flama a esto lo denominamos fijación de frotis por calor seco a fuego directo.
Una vez fijado el frotis queda listo para el proceso de tincion de gram.
Practica #4 Observacion Macroscopica
Observación del desarrollo del microorganismo en medios de cultivo
v Asa bacteriologica
v Mecheros de bunsen
v Vaso de precipitados
v Pie de rey o vernier
v Torundas de algodón secas y con alcohol
Desarrollo:
Las cajas de petri ya sembradas son depositadas en el campo de esterilización que se realiza con los dos mecheros hacia la parte media de la mesa.
Una vez teniendo el campo, de esterilización se observan los crecimientos de lñas cajas petri ; se registra, lo observado, se abre la caja petri, se registra el olor que despide lo que crecio, el color que presenta 7y se registra con graficos, dibujos o fotografias .
Practica #3 Siembra de Cajas Petri
Practica # 3
Siembra de Cajas petri en forma de estrias
Materiales:
v Cajas petri con medio de cultivo ya elaborado
v Muestras de desechos como saliva, espacios interdentales, raspado de piel, orina, agua fresca, sangre.
v Asa bacteriologica
v Mechero de bunsen (2)
v Vaso de precipitado (25 ml. de agua )
v Papel para vestir mesa
v Papel secante
v Torundas de algodón
v Maskingtape
Desarrollo:
1.- Se realiza la toma de una muestra de desechos para sembrarla en forma de estria en caja petri de la siguiente manera.
Con el asa bacteriologica tomamos una pequeña muestra del desecho y sembramos de forma estriada en la caja petri.
2.- El asa bacteriologica se pasa por la flama del mechero para esterilizar y volver a realizar el mismo proceso con otra muestra de desechos.
3.- Una vez sembradas las cajas petri se cierran, se etiquetan aplicando los datos de la muestra y el tipo de estria, nombre de la estria sembrada.
4.- Es importante realizar las siembra en caja petri con barilla de cristal a la cual le damos el nombre de SIEMBRA POR DISPERSION.
5.- Una vez etiquetadas las cajas se entregan al encargado (a) del laboratorio para que se les de entrada al proceso de incubación en la estufa para incubar a 37ºC durante 24, 48, 72 horas.
Practica #2 Tecnica de Esterilizacion
Técnica de esterilización
Se hace hincapié que los alumnos deben de conocer adecuadamente este tipo de tecnica ya que al realizarla tiene mucho riesgo que pude ocacionar un accidente. Se debe tener lista desde el principio de la practica para ahorrar y agilizar tiempo. Debemos tenerla lista higiénicamente con su agua destilada hasta el ras de las parrillas y seguir las indicaciones de la tecnica de esterilización.
Practica #1 Elaboracion de Medio de Cultivo
Practica #1
En esta práctica que se va a realizar se toma en cuenta las 3 etapas que se refieren a pranalitoca, analitica y postanalitica.
Las cuales se deben compaginar con la práctica secuencial.
Instrucciones
1.- El alumno de laboratorio de analisis clínico debe de estar puntual con su equipo de bioseguridad en el laboratorio.
2- solicitar vale de material para que se habiliten todos los materiales a utilizar en la práctica de medio de cultivo.
3.- Una vez estando dentro de laboratorio de forma muy primordial los integrantes de las mesas a trabajar deberán habilitar el equipo de esterilización “autoclave” el cual se debe cargar con agua destilada.
4.- Vestir mesa de laboratorio con papel blanco.
5.-Habilitar línea de gas Lp. Cualquiera de los integrantes debe de abrir la válvula de gas para el mantenimiento de la línea, verificarlo que las de cada mesa estén abiertas las cuales se encuentran debajo de la misma.
Desarrollo
Para realizar un medio de cultivo requrimos de los siguientes materiales:
Matraz de 50 ml.
Vaso de precipitado de 250 ml.
Vaso de precipitado de 50 ml.
Varilla de cristal como agitador
Cajas petri de 5 a 8
Espátula
Balanza
Tape
Envudo de cristal
Torundas de algodón
Papel secante
Medio de cultivo en polvo 450 gr.
Agua destilada
Rehidratamos según las indicaciones que están presentes en la etiqueta del medio de cultivo la cant6idad necesaria de polvo reactivo para la elaboración de 5 a 8 cajas petri
en las que se debe utilizar agua destilada.
Para poder rehidratar el polvo del medio de cultivo necesitamos manejar una regla de 3 la cual nos ayudara a sacar el % en gr.
Pesamos el medio de cultivo en polvo que vallamos a utilizar usando el vidrio de reloj una ves pesado el polvo se mezcla con a agua solicitada en as 5 a 8 cajas.
Para poder mezclar utilizamos el matraz. En su caso dado con u vaso de precipitado, agitando con la varilla de cristal para que no queden grumos una ves terminado este proceso de agitación y mezcla dejamos reposar el tiempo que nos marque el medio de cultivo.
En este espacio de tiempo todo el equipo concensaran sus notas del desarrollo.
Una ves reposado el producto se tienen ya listos los mecheros de bunsen para poder realizar el proceso de ebullición el cual se le dará un min. De tiempo desde que este empiece a a iniciar, se realiza un pequeño giro de muñequeo por encima de la flama azul del mechero siendo muy cuidadoso en que el producto no se derrame ya que puede ocasionar quemaduras de segundo grado.
Se muñequea, se observa el hervor, se retira cuidadosamente y otra ves tomando el tiempo hasta que se cumpla el min. Después se observa, se registra, se deposita en la mesa y se deja enfriar.
Ya estado frió el medio líquido tamponeamos con algodón sellando con tape asegurando bien la boquilla del matraz, etiquetamos con el número de mesa y el nombre del medio de cultivo hora y fecha
Los encargados del proceso de esterilización se encargan de los medios y del autoclave.
Una ves terminando el proceso de esterilización se retira el medio de cultivo del autoclave se deposita en los mecheros los cuales forman el campo de esterilización por radiación.
Llenado de caja petri
Para realizar el llenado de las cajas, deben de estar en el campo de esterilización si no se contamina.
1.- Con el vaso de precipitado realizamos la actividad de vaseado pero antes esterilo9zamos la boquilla del vasito.
Ya terminado esto, vaseamos la cantidad ala caja.
Ya vaseado el material ala caja esta se deja semitapada para que no exista el vapor de agua.
Ya estando solidificado el medio, se tapa, se retira y se asegura con tape para etiquetar con los siguientes datos:
Nombre del medio de cultivo
Fecha
Mesa
Hora